Razlika između verzija stranice "DNK-DNK hibridizacija"

[pregledana izmjena][pregledana izmjena]
Uklonjeni sadržaj Dodani sadržaj
m →‎Primjedbe i ograničenja: datumi: ispravljam "D. Mjesec GGGG" u "D. M. GGGG"
mNo edit summary
Red 1:
'''DNK–DNK hbridizacija''' općenito se odnosi na [[molekulska genetika|molekulsko-genetičku]] tehniku kojom se mjeri stepen genetičke sličnosti između kompariranih fondova [[DNK]] sekvenci. Pritom se običbi određuje međusobna [[genetička distanca]] [[organizam]]a i/ili [[populacija]]. Široko se primijenjujeprimjenjuje u [[filogenija|filogeniji]] i [[Taksonomija|taksonomiji]].
== Metod ==
Radioaktivno označena [[DNK]] jednog organizma se miješa miješa s neoznačenom DNK sa kojom seda se poredi. Mješavina se inkubira kako bi se omogućilo da DNK disocira na polulance i ponovo izduži, te formira hibridni, dvosttruki (dvolančani) niz nukleotida hibridne DNK. Hibridizirane sekvence sa visokim stepenom sličnosti će se povezati čvršće, i zahtijevaju više energije za razdvajanje, tj. one se razdvajaju kada se zagrijavaju na višoj temperaturi nego različitije sekvence. To je proces poznat kao "[[DNK stapanje]]" (eng. ''DNK melting'').
Za procjenu profila stopljenje hibridizirane DNK, dvostruki DNK je potrebno stavittistaviti u kolonu i smešusmjesu grijati u postupnim malim koracima. Na svakom koraku, kolona spere; hibridne sekvence će se u jednom ciklusu spiralizirati i sprati sa kolone. Temperature na kojima označena DNK silazi sa kolone odražavaju količinu sličnosti između sekvenci (a samohibridizirajući uzorak služi kao kontrola). Ovi rezultati se kombiniraju, kako bi se utvrdio stupanj genetičke sličnosti između poređenih [[organizam]]a.
== Primjena u zoologiji ==
Kada se nekoliko vrsta komparira na taj način, mjere sličnosti dozvoljavaju da se rekonstruira [[filogenetsko stablo]]. Zato je ovo jedan od mogućih pristupa istraživanju [[molekula] ] [[biosistematika|biosistematike]]. [[Charles Sibley]] i [[Jon Ahlquist]], pioniri ove tehnike, koristili su DNK-DNK hibridizaciju da ispitaju filogenetske odnose u Sibley-Ahlquist taksonomiji [[ptica]] i Sibley-Ahlquist taksonomiji [[primat]]a.<ref>http://evolution.berkeley.edu/evolibrary/article/_0/history_26 Genetic Similarities: Wilson, Sarich, Sibley, and Ahlquist.</ref><ref>Sibley C. G., Ahlquist J.E. (1984): The phylogeny of the Hominoid primates, as Indicated by DNA–DNA Hybridization. Journal of Molecular Evolution, 20: 2–15| doi=10.1007/BF02101980| pmid=6429338| issue=1}}</ref>
 
== Primjena u mikrobiologiji==