Razlika između verzija stranice "Celulaza"
| [pregledana izmjena] | [pregledana izmjena] |
Uklonjeni sadržaj Dodani sadržaj
No edit summary |
|||
Red 22:
[[Hidroliza|Hidrolizira]] i 1,4-veze β-D-glukanâ koji također sadrže 1,3-veze.
==Struktura==
Većina gljivičnih celulaza imaju strukturu dva-domena, s jednom katalitskom i jednom celuloza-obavezujućom domenom, koje su povezane fleksibilnim linkerom. Ova struktura je prilagođen za rad na nerastvorljivoj podlozi, što omogućuje enzimu dvodimenzionzijsku difuziju na površini. Međutim, postoje i celulaze (uglavnom endoglukanaze) kojima nedostaje linker celuloznne domene. ===Celulazni kompleksi===
U mnogim bakterijama, ''[[in vivo]]'' celulaze su složene enzimske strukture organizirane u supramolekulske komplekse, u celulosome. Sadrže oko pet različitih enzimskih podjedinica i ustvari su endocelulaze, egzocelulaze, celobiaze, oksidacijske celulaze i celulozne fosforilaze, od kojih samo endocelulaze i celobiaze sudjeluju u stvarnoj hidrolizi β(1 → 4) veza .
Celulazni kompleks ''Trichoderma reesei'', primjerice, sadrži komponentu označenu kao C1 (57.000 daltona), koja razdvaja lance kristalne celuloze, kao endoglukanaza (oko 52.000 daltona), kao i egzoglukanaza (oko 61.000 daltona) i β-glukozidaze (76,000 daltona).
U [[genom]]u [[bakterija]] identificirane su brojne "potpisne" sekvence, poznate kao dokerini i kohezini, koje proizvode celulosome. U zavisnosti od njihove sekvence [[aminokiselina]] i tercijarne strukture, celulaze su podijeljeni u klanove i porodice.
==Mehanizam celulolize==
[[Datoteka:Types of Cellulase2.png|thumb|center|500px|Tri tipa katalitskih reakcija celulaze:<br>1. Lom nekovalentnih interakcija u amorfnoj strukturi celuloze (endocelulaza) <br>2. Hidroliza lanca završava razlaganjem polimera u manje molekule šećera (egzocelulaza) 3. Hidroliza disaharida i tetrasaharida u glukozu (beta-glukozidaza)]]
[[Datoteka:Cellulase Mech.jpg|thumb|center|500px|Detalji mehanizma aktivnosti beta-glukosidazne aktivnosti celulaze]]
==Upotreba==
Celulaza se koristi za komercijalnu preradu hrane u kafu. [[hidroliza|Hidrolizira]] celulozu toom sušenja zrna. Osim toga, celulaze se naširoko koriste i u tekstilnoj industriji i proizvodnji deterdženata za pranje rublja. Oni su također, u razne svrhe, koriste u industriji celuloze i papira, a čak i u [[farmacija|farmaciji]]. Celulaza se upotrebljava u fermentaciji [[biomasa|biomase]] u [[biogorivo|biogoriva]], iako je ovaj proces je relativno eksperimentalno u ovom trenutku. Cellulase se koristi kao tretman za phytobezoars, oblik celuloze Bezoar nalazi u ljudskom želucu.
==Mjerenje celulaze==
Kao i prvobitni supstrat, celuloze, je netopive u vodi polimera, tradicionalno smanjuje šećer testova pomoću ovog supstrat ne može biti zaposlen za mjerenje celulaza aktivnosti. Analitička naučnici su razvili niz alternativnih metoda.
===Viskometrija===
[[Viskozimetar]] se može koristiti za mjerenje smanjenja viskoznosti otopine koja sadrži tvari topive u vodi, kao što je derivat celuloze: [[karboksimetil celuloza]], nakon inkubacije s celulaznim uzorkom. Pad viskoznosti je direktno proporcionalan aktivnosti celulaze. Iako su takvi testovi vrlo osjetljivi i specifični za ''endocelulaze'' (egzocelulaze prave malo ili nimalo promjena viskoznosti), ograničeni su činjenicom da je teško definirati aktivnost u konvencionalnim enzimskim jedinicama (mikromol hidrolizirane podloge ili proizvod nja u minuti).
===Celooligosaharidne podloge===
DP-oligosaharidi (DP2-6) su dovoljno rastvorljivi u vodi da se ponašaju kao održive podloge za celulazne enzime. Međutim, kako su ove podloge su i sami '[[reducirajući šećer]]i, nisu pogodne za upotrebu u tradicijskim testovima redukcije šećera jer stvaraju visoku 'praznu' vrijednost. Međutim, njihova celulazom posredovana hidroliza se može pratiti metodima [[HPLC]] ili [[IC]], ta sticanje vrijednih informacija o zahtjevima podloge određenog celulaznog enzima.
===Reducirana celooligosaharidna podloga===
U proizvodnji dgovarajućih šećernih [[alkohol]]a, celo-oligosaharidi mogu biti hemijski reducirani aktivnošću [[natrij borohidrid]] a. Ovi spojevi, u testovima ne reagiraju pri redukciji šećera, ali to činr proizvodi njihove hidrolize. To čini reducirajuće borohidride celo-oligosaharida vrijednim podlogama za test od celulaze, koristeći tradicijske restove reducirajućih šećera, kao što je Nelson-Symogyi metod.
===Bojene polisaharidne podloge===
Ove podloge mogu se mogu podijeliti na dvije klase.
*Nerastvorljive hromogene podloge: nerastopive celulazne podloge, kao što je AZCL-HE-celuloza, kada se stave u rastvor, upijaju vodu za stvaranje želatinoznih čestica, . Ova podloga je postepeno depolimerizovanim i solubilised djelovanjem celulaza. Reakcija se prekida dodavanjem alkalnih otopina, koje zaustavljaju enzimsku aktivnost pa se sadržaj reakcije filtrira ili centrifugira. Boja u filtratu ili supernatant se mjeri i može se odnositi na aktivnosti enzima.
*Rastvorljive hromogene podloge: Uzorak celulaze se inkubira s u vodi topivom podlogom, kao što su azo-CM-celuloze, a reakcija se prekida i fragmenti visoke molekularne težine djelomično hidroliziraju taložeći se iz rastvora, organskim rastvaračima, kao što su [[etanol]] ili methoksietanol. Suspenzija je temeljito izmiješa i centrifugira, a boja u supernatant no otopini (zbog malih, u vodi obojenih fragmenata) se mjeri. Aktivnost enzima može se odrediti pomoću standardne krivulje.
==Također pogledajte==
*[[Celuloza]]
| |||