Druga modifikacija je 3 otvaranje i ''poliadenilacija''. Ako je poliadenilacijski signal (5'AAUAAA-3') prisutan u pre-[[iRNK]] signala, obično se javlja između sekvenci [[protein]a i terminatora. Pre-iRNK se prvo rascijepi, a zatim se niz od ~200 [[adenin]]a (A) dodaje da formiraju poli (A) rep, koji RNK štiti od degradacije. Poli-[[adenin]ski (A) rep je više vezan za [[protein]]e (''PABP''), neophodne za eksport iRNK i ponovno pokretanje [[translacija|translacije]].
Vrlo važna modifikacija [[eukarioti|eukariotskih]] pre-iRNK je ''[[prerada RNK]]''. Većina eukariotskih pre-iRNK sastoji od naizmjeničnih segmenata zvanih [[egzon]]i i [[intron]]i. U procesu prerade, RNK-protein katalizira kompleks poznat kao ''splajsosom'', tj. dvije trans-esterifikacijske reakcije, koje uklanjaju intron i oslobađaju ga u obliku omčaste (laso) strukture. Zatim uvezuju susjedne egzone u određenim slučajevima, neki introni ili egzoni mogu biti uklonjeni ili zadržani u zrelu iRNK. Ova takozvana alternativna prerada (''splicing'' ) stvara niz različitih transkripata porijeklom iz jednog gena, jer ih potencijalno može prevesti u različite proteine, čime prerada proširuje složenost ekspresije [[eukarioti|eukariotskih gena]].<ref>Kapur Pojskić L., Ed. (2014): Uvod u genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, 2. izdanje. Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju (INGEB), Sarajevo, ISBN 978-9958-9344-8-3.</ref><ref>Bajrović K, Jevrić-Čaušević A., Hadžiselimović R., Ed. (2005): Uvod u genetičko inženjerstvo i biotehnologiju. Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju (INGEB), Sarajevo, ISBN 9958-9344-1-8.</ref><ref>Berberović LJ., Hadžiselimović R. (1986): Rječnik genetike. Svjetlost, Sarajevo, ISBN 86-01-00723-6.</ref>
